【48812】沸水浸提——姜黄素比色法测定土壤中有用硼

  ①办法选择的根据：土壤中的硼可分红水溶性硼、酸溶性硼和难溶性硼。全硼含量一般不宜用来判别土壤对植物供给硼的才能。土壤有用硼用沸水浸出后，常用比色法测定。比色测定硼的显色剂许多，以姜黄素应用得最为广泛。姜黄素与硼的显色在水溶液蒸干过程中进行；而四羟基葸醌、胭脂红酸、1，1′日二葸醌亚胺等试剂则只能在浓H2SO4中显色，试剂溶液的制造、储存和比色操作都非常不方便，对玻璃器皿也有较高的要求。姜黄素法避免了这些缺陷，灵敏度也较高，适用于土壤和植物中硼的测定。

  ②办法关键：土样经沸水浸提5分钟，浸出液中的硼用姜黄素比色法测定。姜黄素是由姜中提取的黄素，以酮型和烯醇型存在，姜黄素不溶于水，但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黄色。在酸性介质中与B结组成玫瑰赤色的络合物，即玫瑰花青苷。它是两个姜黄素分子和一个B原子络合而成，检出B的灵敏度是一切比色测定硼的试剂中最高的（摩尔吸收系数3=1.80×155），最大吸收峰在550nm处，在比色测定B时应严控显色条件，以确保玫瑰花青苷的构成。

  玫瑰花青苷溶液在0.0014～0.06ppmB的浓度范围内契合Beer规律。溶于酒精后，在室温下1～2小时内安稳

  ③首要仪器：石英（或其他无硼玻璃）；三角瓶（250或300ml）和容量瓶（100ml，1000ml）；回流设备；离心机；瓷蒸腾皿（Ф7.5cm）；恒温水槽；分光光度计。

  ④试剂：95％酒精（二级）；无水酒精（二级）；姜黄素——草酸溶液：0.04g姜黄素和5g草酸（H2C2O4·2H2O二级）溶于无水酒精中，参加4.2m16NHCl，移入100ml石英容量瓶中，用酒精定容，储存在阴凉处。姜黄素简单分化，最好当天制造。如放在冰箱中，有用期可延长至3～4天。

  B规范系列溶液：0.5716gH3BO3（一级）溶于水，在石英容量瓶中定容成1升，此为100ppmB规范溶液。再稀释10倍成为10ppmB规范贮备溶液。汲取10ppmB溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，用水定容50ml，成为0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ppmB的规范系列溶液，储存在塑料试剂瓶中。

  ⑤操作过程：待测液制备称取风干土壤（通过1mm尼龙筛）10.00g到250ml或300ml的石英三角瓶中，加20.0ml无硼水。衔接回流冷凝器后煮沸5分钟整，当即停火，但持续使冷却水活动。稍冷后取下石英三角瓶，放置顷刻使之冷却，倒入离心管中，加2滴INCaCl2溶液以加快弄清（但不要多加），离心分离出清液。

  测定汲取1.00ml清液（含硼不超越lug），放入瓷蒸腾皿中，参加4ml姜黄素溶液。在55±3℃水浴上蒸腾至干而且持续在水浴上烘干15分钟除掉残存的水分。在蒸腾与烘干过程中显出赤色。加20.0m195％酒精溶解，用于滤纸过滤到1cm直径比色槽中，在550nm波利益比色，用酒精调理比色计的O点。假若吸收值过大，阐明B浓度过高，应加95％酒精稀释或改用580或600nm的波长比色。

  作业曲线ppmB规范系列溶液各1ml，放入瓷蒸腾皿中，加4ml姜黄素溶液，按上述过程显色和比色。以B规范系列的浓度（ppm）对吸收值制作作业曲线。

  ①用本法测定B时，应严控显色条件。姜黄素与B络合构成玫瑰花青苷，需要在无水条件下进行。有水残存会使络合物色彩强度下降。显色时的蒸腾条件如蒸腾时的温度、蒸腾速度和空气活动速度等都一定要坚持共同，不然再现性不良。所用的瓷蒸腾皿要通过选择，以确保其形状、巨细、厚薄尽或许共同。恒温水浴应尽或许选用水层较深的水浴，而且彻底打开，将瓷蒸腾皿直接漂浮在水面上。水浴的水面应尽或许高，使蒸腾皿不致被水浴的四壁挡住而影响空气的活动，以确保蒸腾速度的共同。蒸腾至干后持续在同一温度下坚持15分钟，使脱水彻底。蒸腾和脱水时的常用温度是55℃±3℃，温度更高时，或许会引起B的丢失。

  ②硬质玻璃中常含有硼，所运用的玻璃器皿不该与试样溶液作长期触摸。加热浸提土壤水溶性硼时，最好运用石英玻璃制的三角瓶。用其他玻璃的制品时，应先进行空白试验，调查空白值的巨细，决议其是否能用。用扣除空白的办法来消除玻璃器皿的污染有时是难于见效的。在加热温度不高时，瓷器皿可用于B的测定。聚四氟乙烯制品是适用的。

  ④若NO-3浓度超越20ppm，对B的比色测定有搅扰，有必要加Ca（OH）2使呈碱性反响，在水浴上蒸腾至干，再渐渐灼烧以损坏硝酸盐。再用一定量的0.1NHCl溶解残渣。汲取1.00ml溶液进行比色测定硼。

  ⑤若土壤中的水溶性硼含量过低，比色产生困难，能够精确汲取较多的溶液，移入蒸腾皿中，加少量饱满Ca（OH）2溶液使之呈碱性反响，在水浴上蒸腾至干。参加恰当体积（例如5.00ml）的0.1NHCl溶解，汲取1.00ml进行比色。因为待测溶液的酸度对显色有特别大的影响，所以规范系列也应按相同过程处理。

  ⑥蒸腾显色今后，应将蒸腾皿从水浴中取出擦干，随即放入干燥器内，待比色时再随时取出。蒸腾皿不该长期暴露在空气中，避免玫瑰花青苷因吸收空气中的水分而产生水解，使测定成果不精确。

  ⑦显色测定过程中，主张仍是不要半途中止。如因故有必要暂停作业，应在参加姜黄素曾经暂停，而不要在参加姜黄素今后，不然会使成果不精确。

  ⑧比色过程中，因为乙醇的蒸腾丢失，体积缩小，使溶液的吸收值产生改动，故比色作业应尽或许敏捷。比色时用酒精作参比，调整比色计吸收值的零点。

  1、仪器机身选用结构一体式规划，安定可靠，主体选用1毫米厚度的品牌冷轧板合作静电粉末涂装，愈加耐磨、耐腐蚀;

  2、从空开到触点，继电保护器到按钮开关等，选用正泰/德力西或同等级品牌电气，确保仪器质量和的运用寿命;

  3、PLC操控，功用微弱安稳，7寸触控屏操作和显现一触即达，一切功用设置均集成于屏幕中;